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酶标分析仪免疫吸附试验的基本操作原理
作者：admin 时间：2021-06-29 01:39:06 点击次数:1059
1、先将多余的特异性抗体(或抗原)涂在载体(酶标板)上，通过抗原-抗体反应使副物质(抗原或抗体)和酶标(用hrp -辣根过氧化物)。酶标抗体或抗原)也与载体结合(固相分离)。洗去游离酶标签后，添加底物。与载体结合的标记酶促进了底物的颜色。*后，利用光电比色法对测试对象进行定性判断或定量测定。上述方法的灵敏度可达ng/ml水平。
2、包覆ELISA板:在ELISA板孔中加入特异性抗原溶液，4℃过夜。然后洗3到5次,清洗解决方案(档板洗板),以便解决方案是坚定的特异抗原吸附表面的微量滴定板的微量滴定板,形成固相抗原和残余液体杂质冲走。
3、将待测样品溶液(患者血清)加入酶标仪:如果样品溶液中含有待测抗体，经孵育反应后，会与被包被抗原特异性结合，产生被包被抗原与待测抗体的结合物。配合物被吸附在微量滴定板的微孔表面。然后再次清洗，以清除残留的液体和干扰物质。
4、添加酶偶联物:孵育反应后，形成包被抗原+试验抗体+酶标记抗原的三组分复合物，也吸附在微孔表面，再进行洗涤，去除游离或非特异性酶偶联物(洗盘)污渍。
5、加显色液:显色反应10分钟至20分钟后，被吸附络合物中的酶与显色底物溶液形成显色液。此时，由于游离或非特异性吸附的酶已被去除，溶液的颜色仅取决于已与被分析物结合的酶的数量，所以它能真实反映被分析物的浓度。酶凝固的越多，颜色就越深，这意味着被分析物的浓度就越大。
6、加停止液:停止显色反应。
酶标分析仪检测:将显色的酶标板放在酶标仪上进行光电比色检测。该仪器检测空白孔、阴性和阳性对照孔、标准孔、质控孔和患者样品孔的吸光度。值，并根据程序要求自动计算患者样本中分析物的浓度或进行定性分析。
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