酶标分析仪,也称为酶联免疫吸附测定仪或微孔板检测器,是一种基于酶联免疫吸附实验原理的高度自动化检测设备。以下是对其工作原理、用途和应用范围的详细阐述:
一、工作原理
酶标分析仪的工作原理主要通过酶标记的抗体与待测样品中的抗原特异性结合,进而通过特定底物与酶反应产生颜色变化或荧光信号。这些信号随后被仪器利用光电比色法或荧光检测法进行定量分析。具体过程如下:
样品准备:根据实验要求,制备并稀释待测样品。
加样:将样品、标准品、阴性对照和酶标抗体等按照实验步骤顺序加入到酶标板相应的孔中。
反应孵育:在恒温环境中(通常为37℃)孵育一段时间,使酶标抗体与样品充分结合。
洗涤:孵育后,用洗涤液去除未结合的酶标抗体及其它非特异性物质。
显色:加入酶作用的底物,如有相应抗原,则酶会催化底物产生颜色反应或荧光反应。
终止反应与读数:在一定时间点加入终止液终止显色反应,然后使用酶标分析仪在特定波长下读取各孔吸光度或荧光强度,通过对比标准曲线得出样品中目标物质的浓度。
酶标分析仪本质上是一台变相的光电比色计或分光光度计,其核心是一个比色计。光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔板中的待测标本。该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这些光信号转换成相应的电信号。电信号经过一系列信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,*后由显示器和打印机显示结果。部分酶标分析仪还具备自动扫描和进样功能,以提高检测效率和准确性。
二、用途
酶标分析仪主要用于生物样本中待测物的定性和定量分析,广泛应用于多个领域,包括临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学等。
三、应用范围
临床检验:用于检测各种生物标志物、激素、抗体、抗原等,在疾病诊断、治疗监测和预后评估中发挥重要作用。
生物学研究:在分子生物学、细胞生物学和免疫学等领域,酶标分析仪被用于核酸、蛋白浓度及酶活性分析等常规分子检测,以及信号转导研究和整体细胞水平的分析。
农业科学:在植物领域,酶标分析仪可用于DNA、RNA和蛋白的定量及纯度分析等基础研究。
食品和环境科学:在食品安全检测中,酶标分析仪可用于农药残留、添加剂、重金属等有害物质的检测;在环境监测中,可用于水质、土壤和空气等样本中污染物的检测。
综上所述,酶标分析仪凭借其高精度、高灵敏度和自动化程度高的特点,在多个领域发挥着重要作用。